Стандартные эритроциты для определения групп крови

0
134

Перекрестный метод определения группы крови предусматривает выявление наличия/отсутствия антигенов А и В изогемагглютинирующими сыворотками и одновременно выявление антител α и β при помощи стандартных эритроцитов. Этот вариант исследования чаще всего используют в серологических лабораториях.

Что необходимо для исследования

Для типирования крови пациента, что необходимо перед хирургическим вмешательством, переливанием и в ряде других случаев, потребуются стандартные сыворотки и эритроциты, а также:

  • физраствор 0,9%
  • пластмассовые или стеклянные палочки отдельно для каждой ячейки;
  • пластинки.

Используют сыворотки групп 0, А, В, АВ, а также стандартные эритроциты соответственно 0, А и В. Требования к проведению исследования: хорошее освещение, температура в комнате в пределах 15–25 °C. 5–10 % взвесь эритроцитов может быть получена от 2–3 людей с одной группой крови. Также должны быть соблюдены условия хранения реагентов – температура не выше + 4 °C.

Алгоритм перекрёстного исследования

Подготовка венозной крови пациента (в объёме 3–5 мл) для исследования заключается в её центрифугировании, после чего её оставляют минимум на 2 часа для получения сыворотки. Затем:

  1. Стандартные эритроциты для определения групп крови в растворе натрия хлорида 0,9% отмыть однократно.
  2. Подготовить планшет. Промаркировать каждую лунку соответствующими группами крови 0(I), A(II), B(III), указать данные пациента, кровь которого взята на исследование.
  3. Одну большую каплю стандартной сыворотки объемом около 0,1 мл наносят в лунку планшета. Нанесение дублируют – каждый реагент соответствующей группы наносят дважды в отдельную лунку.
  4. В выемки с соответствующим обозначением нанести капли объёмом 0,03 мл 0, А, В стандартных эритроцитов.
  5. С использованием стеклянных палочек осторожно перемешать эритроциты и сыворотку.
  6. Минимум 3 минуты аккуратно покачивать планшет, после чего оценить реакцию агглютинации.

Уже на первой минуте после соединения двух капель реагентов с кровью наступает агглютинация, но стандартно рекомендуется оценка результата через 3–5 минут.

Трактовка результатов

Принципиально невозможна специфическая агглютинация с любыми сыворотками в эритроцитах, принадлежащих группе 0(I) – в них отсутствуют антигены, которые могли бы вступать в соответствующую реакцию. Поэтому такие стандартные эритроциты при оценке результатов считаются контрольными. Достоверным считается тот результат, когда совпадает наличие агглютинации в лунке со стандартными эритроцитами и изогемагглютинирующими сыворотками.

Расшифровка:

  • если в сыворотках реакция отсутствует, но наблюдается в эритроцитах II и III, это соответствует первой группе крови;
  • агглютинация в сыворотках I и III и в эритроцитах III – вторая группа;
  • наличие реакции в сыворотках I и II и эритроцитах II – третья;
  • агглютинация в трех лунках с сыворотками I, II и III и её отсутствие во всех образцах с эритроцитами – четвертая.

Достоверными считаются те результаты, при оценке которых совпадают реакции в лунках с эритроцитами и сыворотками. При любых неточностях необходимо переделать исследование с применением тех же реагентов.

Ошибочная реакция может возникнуть при несоблюдении правил исследования, например, использовании мокрых палочек, смешивании контрольных образцов при слишком сильном покачивании тарелки, неправильном порядке распределения реактивов. Также к этому может привести применение загрязнённых или просроченных стандартных эритроцитов.

ОСТАВЬТЕ ОТВЕТ

Please enter your comment!
Please enter your name here